Chromatographie de partage centrifuge

La Cromatografía de Reparto Centrífugo (CPC) es un método de separación basado en el reparto de los componentes entre dos fases líquidas.  Gracias al campo de fuerza centrífuga generado por la rotación de la columna (o rotor), una fase se mantiene estacionaria  en el rotor (fase estacionaria) mientras que la otra, móvil, es bombeada a través del rotor. Los componentes emigran con arreglo a su coeficiente de reparto Kd :

Proceso de separació de 3 componentes con diferentes coeficientes de reparto : 

Para una mejor comprensión, el rotor de FCPC puede ser comparado con ampollas de decantación.

Las ampollas son cumplidas con la fase estacionaria (en este ejemplo, la fase la más ligera del sistema bifásico). En una primera etapa, la muestra, disuelve en la fase estacionaria, es vertida en la primera ampolla . Después, la fase móvil es añadida (la más pesada), en un volumen equivalente al de la fase estacionaria y la ampolla es agitada. Durante la decantación,  los componentes se separan según su affinidad par una o la otra de los fases (según su coeficiente de reparto). En la tercera etapa, la media de la fase móvil es añadida en la primera ampolla mientras la fase pesada es retirada y vertida en la ampolla siguiente.  Estas etapas son repetidas hasta que los 3 componentes salgan del rotor.

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En CPC, diferentes modos pueden ser utilizados. Los dos fases son líquidas, pués es posible de eligir su papel respectivo (estacionario o móvil).
Así como en toda cromatografía,  se habla del  modo  inverso cuando la fase estacionaria es más polar que la fase móvil  mode  y  de modo normal en caso contrario.
En CPC, es también posible de trabajar en modo descendente (cuando la fase móvil es más pesada que la fase estacionaria) o subida (la fase estacionaria es la más pesada).

Modos de elución : 

A los modos gradiente e isocratico, un otro modo de elucion específico al CPC puede ser utilizado: Dual Modo. Este modo consiste en invertir el papel de las fases durante la misma manipulación.                                                                                                    

Etapa 1 :
A, B, C, D, E son cinco componentes de una mezcla. Sus afinidades con la fase móvil son crecientes de A a E. Con arreglo a su coeficiente de reparto, cada componente emigra a su propia velocidad hacia la salida del rotor.

Etapa 2:
Los componentes A y B son fuertemente retenidos en la fase inferior estacionaria. Su migración es menos rápida que los compuestos C, D y E.

Etapa 3:
La migración de los componentes A y B necesita demasiado tiempo para atravesar todo el rotor.
Así como las fases son líquidas, es posible invertirlas: la fase estacionaria se vuelve móvil y vice-versa. Los componentes salen por la entrada de la columna.

Modos de desplazamiento :

     1- pH-zone refining

    Este modo es utilizado para la purificación de componentes cón carga eléctrica que depende del valor del pH. Por ejemplo, una mezcla de 3 bases es inyectada en la fase estacionaria inorgánica que contiene un "retainer" básico. Los componentes básicos emigran en el rotor vía la fase móvil donde un "displacer" ácido ha sido añadido. Los compuestos son aislados en los efluentes en forma de sales. La acción conjugada del "retainer", del "displacer" y del sistema de disolventes favorece la separación de los compuestos con arreglo a su coefficent de reparto y de su polaridad.

     2-Ion pairs displacement

Este modo está basado en el principio del par de iones: la solubilidad de un compuesto jónico depende de la naturaleza del contra ion, del pH y de los disolventes.